核酸杂志

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依托泊苷、博莱霉素和甲磺酸乙酯对培养的CHO细胞的遗传毒性作用:GC-MS/MS和彗星试验分析

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杂志简介

核酸杂志发表原始研究文章以及综述文章,涵盖DNA和RNA研究的所有结构、化学和功能方面。

编辑焦点

主编巴苏教授目前在康涅狄格大学工作。他的研究重点是确定抗肿瘤药物、化学致癌物质、氧化或辐射对DNA损伤的后果。

特殊的问题

你认为有一个新兴的研究领域真的需要强调吗?或者是一个被忽视的现有研究领域,或者可以从更深入的调查中获益?通过主持一期特刊来提高一个研究领域的知名度。

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研究文章

电化学氧化损伤DNA的细胞参考材料

需要参考材料来量化细胞中的DNA损伤水平,以评估测量可变性的来源,并比较来自不同实验室的结果。彗星试验(单细胞凝胶电泳)是一种广泛使用的方法来确定DNA损伤的链断裂形式。在这里,我们检查了电化学氧化在培养的哺乳动物细胞中产生DNA损伤的使用,并使用彗星试验量化其百分比。将中国仓鼠卵巢(CHO)细胞置于氧化铟锡电极表面,在0.5 ~ 1.5 V (vs Ag/AgCl)电化学电势下培养12 h。获得的细胞通过comet和细胞活力试验进行分析。我们观察到,随着氧化电位值的增加,随着细胞活力的丧失,链断裂的百分比(DNA在尾部)呈线性增加。结果表明,在良好控制的条件下,电化学诱导的DNA损伤可在哺乳动物细胞中产生,可作为彗星实验的细胞参考材料。

研究文章

第I组的遗传清晰度新策略芽孢杆菌利用编码丝氨酸样酶的纤溶酶基因从发酵食品和饮料中分离的物种

纤溶酶基因(fibE)是广泛保守的芽孢杆菌属第一类种。这是在细胞外培养基中分泌的丝氨酸样酶(FibE)的编码。本研究旨在评估这一新的保守管家基因在第一类中的分子作用芽孢杆菌目的:鉴定和鉴别刚果共和国传统发酵食品和饮料中一些相关菌株。首先,用酪蛋白溶解试验筛选了155个分离株的酶活性。采用PCR技术和16S RNA测序相关引物的巢式PCR方法。印迹技术已被用于与分子方法的深入比较。作为一个结果b . amyloliquefaciens (1),地衣芽b (1),枯草芽孢杆菌(1),b、(3),b . altitudinis(2),b . atrophaeus (1),b . safensis (3)已在发酵食品和饮料中发现的155个分离菌中明确鉴定。谷胱甘肽s转移酶(GSTs)与纤维成熟蛋白融合的遗传分析及过表达大肠杆菌与野生型相比,BL21和TOP10的酶活性提高了2倍。免疫检测应该是相关的,但这并不能明确区分芽孢杆菌属于第一类的。

研究文章

XPF的失活使癌细胞对吉西他滨敏感

吉西他滨(2 ',2 ' -difluorodeoxycytidine;dFdC)是一种脱氧胞苷类似物,主要用于治疗胰腺癌。吉西他滨的细胞毒性是由于抑制DNA复制。然而,去除合并的dFdC的机制在很大程度上是未知的。在本报告中,我们发现核苷酸切除修复蛋白XPF- ercc1参与了吉西他滨诱导的DNA损伤的修复,XPF的失活使细胞对吉西他滨敏感。进一步分析发现XPF-ERCC1与apurinic/apyrimidinic内切酶(APE)共同修复吉西他滨诱导的DNA损伤。我们的结果证明了在吉西他滨治疗中评估DNA修复活动的重要性。

评论文章

Netrin家族:蛋白质亚型在癌症中的作用

Netrins形成一个分泌的和膜相关的蛋白质家族。Netrins通过调节细胞迁移和存活参与轴突引导、形态发生和血管生成的过程。这些过程在肿瘤生物学中是特别有趣的。netrin基因的各种异构体被翻译并通过选择性剪接进行调控。我们在这里回顾netrin家族成员的多样性和他们在癌症中已知和潜在的作用。

研究文章

DNA连接酶IV防止复制叉停滞和促进三阴性乳腺癌细胞增殖

DNA损伤是癌症的标志,而维持基因组保真度的蛋白质的突变和错误调节与多种癌症的发展相关。DNA双链断裂被认为是最有害的DNA损伤类型。非同源端连接(NHEJ)通路是修复DNA双链断裂的一种机制,参与NHEJ的蛋白质也可能调节DNA复制。我们先前建立了DNA-PKcs,一种NHEJ蛋白,促进细胞暴露于复制胁迫后基因组的稳定性和细胞活力;我们想了解另一种NHEJ蛋白,DNA连接酶IV (Lig4),是否具有这种表型。我们的研究集中在三阴性乳腺癌细胞上,与非基底性乳腺癌相比,LIG4通常是扩增的,并且基因剂量的增加与更高的Lig4表达相关。我们使用siRNA清除了Lig4,并通过qPCR和western blotting证实了我们的敲除。仅Lig4耗尽就会导致细胞存活率下降,这与复制叉延迟增加有关。检查点蛋白Chk1的激活和去磷酸化在lig4缺失的细胞中没有变化。在羟基脲暴露后,Lig4的消耗导致了持续的DNA-PKcs磷酸化。了解Lig4对基因组复制和复制应激反应的影响将阐明抑制Lig4活性的生物学后果。此外,Lig4是引导CRISPR/ cas9介导的修复从NHEJ转向同源定向修复的一个有吸引力的临床靶点,因此理解如何减少Lig4对细胞生物学的影响至关重要。

研究文章

SERPINA1 mRNA治疗α -1抗胰蛋白酶缺乏症

α -1-抗胰蛋白酶(AAT)缺乏症是一种遗传疾病,由于编码AAT的SERPINA1基因突变而产生非活性/缺陷AAT。这种疾病与肺中AAT活性降低和肝脏中过量缺陷AAT蛋白沉积有关。目前还没有专门治疗与AAT缺乏症相关的肝病的方法。AAT肺病通常用几种血清蛋白替代产品中的一种进行治疗;然而,关于SerpinA1替代疗法的有效性的长期研究尚不存在,而且它也不能减少AAT缺乏时的肝损伤。mRNA治疗可能同时针对AAT缺陷患者的肝脏和肺部。用SerpinA1编码的mRNA转染AAT患者成纤维细胞和AAT患者成纤维细胞来源的肝细胞,并检测细胞培养液中SerpinA1的表达。我们的数据表明,来自治疗过的AAT患者成纤维细胞和AAT患者成纤维细胞来源的肝细胞的培养基中SerpinA1蛋白增加。在野生型小鼠体内的研究表明,SERPINA1 mRNA在肝和肺中的生物分布,以及SERPINA1蛋白在这两个靶器官中的表达,这两个靶器官在AAT缺乏时受到严重影响。综上所述,我们的数据表明SerpinA1 mRNA治疗有可能使AAT缺乏患者受益。

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