喀麦隆传统医学中用于治疗伤寒的药用植物大马鞭草(马鞭草科)叶片水提物的毒理学概况

摘要

Tectona茅（t .茅)是一种药用植物，在喀麦隆广泛用于治疗伤寒和其他几种疾病。尽管它被广泛用于医疗目的，但尚未进行任何研究来评估其潜在的毒性影响。本研究旨在评估急性和亚慢性毒理学概况Tectona茅大鼠叶提取物。急性毒性研究没有发现大鼠的行为障碍或死亡。致死剂量(DL₅₀)的含量大于5000毫克/公斤体重。亚慢性毒性研究显示，在整个治疗期间，大鼠在试验剂量下的体重增加没有显著变化。然而，在所有剂量下，丙氨酸转氨酶活性和血清蛋白水平显著下降。碱性磷酸酶活性在30、90和270 mg/kg剂量下下降，在810 mg/kg体重剂量下升高。血清和尿尿素水平在剂量为270和810 mg/kg体重时同时升高。反复给药也增加了两性的总胆固醇和高密度脂蛋白水平，并与各自的对照进行比较，发现所有动物的高密度脂蛋白与低密度脂蛋白之比均大于1。但在810 mg/kg剂量时，动物肾脏切片出现坏死，肝脏切片出现血管充血。水提物t .茅在30和90 mg/kg剂量急性和亚慢性治疗后，未导致任何不良反应。因此，该提取物可用于伤寒植物药的处方，治疗剂量为30 mg/kg，但在此之前，必须进行慢性和诱变毒性评估。

1.背景

许多研究工作已经认识到药用植物对健康的有益作用以及它们预防许多疾病的能力[1］．因此，使用易于获得和有效的药用植物将是促进和增进健康的更好和负担得起的替代办法[2］．然而，在过去的几十年里，药用植物的质量控制、疗效和安全性验证的不足引起了人们的关注[3.］．这些中毒通常是由有毒化合物引起的，如吡咯利西定、维辛、雄座甲毒素和5-羟基萘酚[4]，其存在于这些植物中会不可逆地损害肝脏、肾脏和血细胞[5］．一些研究表明植物提取物的有害作用，如扶桑，叶子花属海棠,草决明［6，7］．因此，对这些植物的安全性/毒性评价如Tectona茅广泛鼓励使用动物模型，因为这些动物对化学制剂的反应可以转化为人类。

Tectona茅柚木是马鞭草科的一种植物，常见于印度和热带国家，被称为“柚木”。不同的部分(叶子，树皮和根)8，9];心材[10];根心材[11])这种植物含有许多次级代谢产物，这证明了它作为抗炎、泻药、收敛和镇痛的传统用途是合理的[12］．在喀麦隆，传统上它被用于Moungo科(Loum)治疗糖尿病和伤寒在体外而且在活的有机体内抗伤寒的活性最近得到证实[13］．分离的化合物Tectona茅叶片具有多种生物活性:萘四酚、蒽酮和析酚A具有化感作用[14]，而构造大酮、夸地醌A和羟基沙酮具有抗菌和抗疟疾活性[15］．以前的毒理学研究表明，甲醇种子和叶提取物t .茅白化小鼠单次口服后无毒[16，17］．由于植物的化学成分和活性/毒性可能因采收地点和提取溶剂类型的不同而有所不同，因此研究这种“喀麦隆”植物的潜在副作用是很重要的t .茅单次多次给药后会对消费者造成不良影响。

2.材料与方法

2.1.植物材料

的叶子Tectona茅于2018年8月在Loum(喀麦隆滨海地区Moungo分区)收割。该植物是在喀麦隆国家植物标本室与保存在编号18580/SRF Cam (D. Dang botancollection No. 160 Ref.)下的参考样本相比较确定的。

2.2.提取物的制备

的叶子Tectona茅收获后，在太阳下晒干(约25°C)，然后碾碎。必威2490用Duke描述的方法制备水提取物(汤剂)。18］．为此，将500克粉末加入5升蒸馏水中，将混合物煮沸15分钟。冷却后，混合物用Whatman N°1纸过滤，滤液在40°C的通风烘箱(Memmert)中干燥，直到溶剂完全蒸发。提取的提取物避光保存，4℃保存。

2.3.实验动物

本研究采用Wistar白化大鼠。它们是在喀麦隆Dschang大学生物化学系的动物房里繁殖的。将大鼠单独安置在23±1°C的聚丙烯笼中，进行12 h: 12 h的暗:光循环。这些动物被提供了标准的饮食和水随意,并于实验开始前12 h撤食。根据喀麦隆德斯昌大学机构伦理审查委员会的建议，这项工作是在动物福利方面进行的。遵守处理实验动物的伦理准则和程序。

2.4.急性毒性研究

采用9只健康雌性大鼠(8周龄;质量:150-155 g)，为未孕和未孕[19]，随机分为三组，每组三只。I组为对照组，II组和III组分别给予2000和5000 mg/kg的剂量t .茅一个接一个，时间间隔为48小时。每只动物都用胃内管灌胃提取物。3只大鼠在2000 mg/kg剂量下连续存活后，再给予5000 mg/kg剂量。试验结束时，三只连续大鼠存活到5000毫克/公斤的有限剂量。

给药后，在给药后的前3小时和之后的14天内记录死亡率和临床体征。在14天内，评估了许多中毒的身体症状[20.］．观察14天后，对每只动物进行尸检，最终观察到肝脏、肾脏、肺和心脏等器官的宏观变化。

2.5.Subchronic毒性

按照标准方法进行28天的亚慢性毒性研究[21，2240只大鼠(公20只，母20只;年龄:8-9周;质量:180-200 g)随机分为5组，每组4只，性别不限。大鼠胃灌胃灌胃t .茅以30 mg/kg, 90 mg/kg, 270 mg/kg和810 mg/kg的体重剂量，分别为批次1,2,3和4，持续28天。第5批是男女的对照组。按照Kamsu等人的描述，28天内每天测定食物摄入量和体重。[22］．28号^th测试当天，在灌胃后，这些动物进行12小时的禁食，结束时收集尿液。随后用安定/氯胺酮(每100克动物0.2/0.1 ml)麻醉动物，心脏穿刺采血。

2.6.血液分析

穿刺后，少量血液被引入含有抗凝剂(EDTA)的无菌管中，并立即使用阻抗血液学自动机(QBC Autoread Plus, UK)进行血液计数。

2.7.生物化学分析

用于生化分析，血液样本在4°C, 3000 ×g离心10分钟。离心后将血清与血液分离，在- 20°C保存，待分析。生化参数如血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、总蛋白、血清和尿肌酐、血和尿尿素、总胆固醇、甘油三酯和高密度脂蛋白胆固醇含量使用商用试剂盒(Spinreact, S.A.U Ctra)进行测定。西班牙圣科洛纳)。

2.8.组织病理学分析

组织病理学分析在肝脏和肾脏组织切片上进行。安乐死后，所有的动物都被解剖，肝脏和肾脏等主要器官被手术取出，并固定在10%福尔马林和生理盐水中。第5节μm在旋转显微镜上获得，然后用苏木精-伊红(HE)染色[23］．然后使用集成数字摄影相机(EVOS XL, USA)的显微镜在×40的客观放大倍数下对40只试验动物切片的染色切片进行分析，以发现可能的异常。将治疗组的组织学与对照组进行比较。经过检查，在文件中选择和展示的肝脏和肾脏的显微照片代表了组中4只动物中至少3只动物观察到的总体外观。

2.9.统计分析

采用SPSS 23.0 for Windows软件进行统计分析。结果以平均值±标准差(SD)表示，比较采用单因素方差分析检验进行方差分析。对照组和药物治疗组的平均值之间的差异是用沃勒-邓肯检验来区分的。小于0.05为有统计学意义。

3.结果

3.1.急性毒性研究

表格1显示动物在观察后的头三个小时内的行为t .茅．可见，给药组动物未出现死亡或毒性迹象。这种提取物的致死剂量(DL50)大于5000 mg/kg体重。然而，给予5000 mg/kg提取物的动物在给药后2小时内是平静的，但在给药后会感到激动。无显著差异(在体重增加中观察到< 0.05)1)和动物的相对器官重量(表2)．然而，在第1周观察到动物体重的剂量依赖性增加。


组	死亡人数/总人数	中毒迹象/行为改变

控制	0/3	无毒性作用
2000毫克/公斤	0/3	无毒性作用
5000毫克/公斤	0/3	服药后2小时内镇静，服药后激动


组	肝脏(g)	肾脏(g)	脾(g)	肺(g)	心(g)	生殖腺(g)

控制	4.09±0.04^一个	0.72±0.01^一个	0.31±0.01^一个	0.58±0.01^一个	0.30±0.01^一个	0.03±0.01^一个
2000毫克/公斤	3.98±0.14^一个	0.70±0.07a^一个	0.30±0.02^一个	0.59±0.09^一个	0.29±0.02^一个	0.03±0.01^一个
5000毫克/公斤	3.91±0.49^一个	0.69±0.08^一个	0.31±0.02^一个	0.58±0.08^一个	0.29±0.02^一个	0.03±0.01^一个

数据以平均值±标准差表示，n= 3。根据沃勒-邓肯多重比较检验(< 0.05)。

3.2.亚慢性毒性研究

3.2.1.食物消费的演变

数字2显示了在28天内，不同剂量的提取物的动物饲料消耗的演变。可以看出，反复给药的水提取物t .茅与对照动物相比，雄性和雌性大鼠的食物消耗没有产生任何显著差异。

(一)

(b)

3.2.2.体重的进化

数字3.显示了在28天内，不同剂量的提取物的动物饲料消耗的演变。这一数字表明，在28天试验期间，与对照组相比，服用所有剂量的男女体重都没有显著增加。

(一)

(b)

3.2.3.相对器官重量的变化

叶水提取物的作用t .茅给药28天后动物相对器官重量的变化见表3.．结果表明，与对照组相比，在给药28天后，大鼠的肝、肾、脾、肺、心和性腺重量均无明显变化。


组	肝脏(g)	肾脏(g)	脾(g)	肺(g)	心(g)	生殖腺(g)

男性
控制	3.20±0.18^一个	0.64±0.04^一个	0.27±0.10^一个	0.51±0.08^一个	0.27±0.01^一个	0.92±0.04^一个
30毫克/公斤	3.10±0.11^一个	0.63±0.02^一个	0.30±0.10^一个	0.50±0.06^一个	0.29±0.02^一个	0.97±0.12^一个
90毫克/公斤	3.09±0.29^一个	0.62±0.02^一个	0.29±0.05^一个	0.51±0.03^一个	0.28±0.01^一个	0.96±0.09^一个
270毫克/公斤	3.45±0.58^一个	0.68±0.11^一个	0.37±0.19^一个	0.57±0.18^一个	0.31±0.03^一个	0.96±0.04^一个
810毫克/公斤	3.08±0.29^一个	0.65±0.05^一个	0.20±0.03^一个	0.43±0.04^一个	0.28±0.04^一个	0.92±0.10^一个

女性
控制	3.20±0.41^一个	0.63±0.07^一个	0.27±0.09^一个	0.60±0.09^一个	0.31±0.03^一个	0.05±0.01^一个
30毫克/公斤	3.33±0.25^一个	0.64±0.05^一个	0.33±0.07^一个	0.49±0.04^一个	0.28±0.03^一个	0.04±0.01^一个
90毫克/公斤	3.16±0.24^一个	0.63±0.04^一个	0.32±0.08^一个	0.48±0.09^一个	0.30±0.02^一个	0.05±0.01^一个
270毫克/公斤	3.17±0.10^一个	0.65±0.04^一个	0.26±0.06^一个	0.53±0.05^一个	0.33±0.05^一个	0.05±0.01^一个
810毫克/公斤	2.96±0.10^一个	0.63±0.04^一个	0.25±0.10^一个	0.52±0.08^一个	0.29±0.02^一个	0.05±0.01^一个

数据以平均值±标准差表示，n= 4。根据沃勒-邓肯多重比较检验(< 0.05)。

3.2.4.血液参数的变化

表格4显示了水提取物的效果t .茅重复给药28天后血液参数的变化。它表明除了一个显著的(雄性在90和270 mg/kg时血红蛋白水平和270 mg/kg时红细胞压积水平下降< 0.05)，与对照组相比，各剂量提取物对雌雄动物的其他血液学参数均无显著影响。


组	红血球(×10⁶/μL)	血红蛋白(g / dL)	HCT (%)	白细胞(×10^3./μL)	LYM (%)	中期(%)	格兰(%)	PLT (10^3./μL)

男性
控制	8.60±0.41a	16.83±0.55b	50.97±1.69b	12.30±0.96^一个	69.70±9.19^一个	9.47±3.74^一个	20.83±5.46^一个	527.00±101.95^一个
30毫克/公斤	8.32±0.53a	16.57±0.95b	52.20±3.92 2b	13.57±1.42^一个	67.67±0.74^一个	14.23±0.50^一个	18.10±1.21^一个	537.33±133.72^一个
90毫克/公斤	7.80±0.19a	15.10±0.36a	46.40±2.76ab	13.07±2.45^一个	65.37±10.61^一个	10.53±3.16^一个	24.10±7.45^一个	438.33±112.72^一个
270毫克/公斤	7.98±0.48a	15.00±0.44a	43.83±4.37a	13.10±2.81^一个	61.17±7.43^一个	13.57±2.12^一个	25.27±5.84^一个	486.67±64.76^一个
810毫克/公斤	8.23±0.38a	16.00±0.36ab	47.93±2.41 ab	13.13±0.75^一个	60.97±4.00^一个	12.43±0.50^一个	26.60±3.50^一个	565.67±47.61^一个

女性
控制	7.67±0.49^一个	15.57±0.85^一个	47 40±3,58^一个	9.43±1.58^一个	66.77±3.58^一个	12.37±0.38^一个	20.87±3.95^一个	551.00±124.83^一个
30毫克/公斤	7.83±0.88^一个	15.60±0.95^一个	48.37±6.68^一个	12.20±4.33^一个	75.87±6.36^一个	10.70±1.30^一个	16.43±5.49^一个	467.67±58.05^一个
90毫克/公斤	7.88±0.45^一个	15.60±0.46^一个	46.90±1.84^一个	11.03±1.76^一个	69.40±4.16^一个	10.40±0.44^一个	20.20±3.84^一个	549.00±62.43^一个
270毫克/公斤	8.08±1.06^一个	15.53±0.76^一个	47.77±5.76^一个	11.33±1.19^一个	72.60±7.67^一个	10.57±3.61^一个	16.83±5.44^一个	653.00±133.41^一个
810毫克/公斤	7.84±0.43^一个	15.43±1.24^一个	47.70±3.20^一个	11.80±0.96^一个	69.80±1.40^一个	11.70±2.59^一个	18.50±3.30^一个	740.67±219.72^一个

数据以平均值±标准差表示，n= 4。根据沃勒-邓肯多重比较检验(< 0.05)。红细胞:红细胞;血红蛋白:血红蛋白;LYM:淋巴细胞;MID:平均红细胞体积;格兰:粒细胞;白细胞:白细胞;PLT:血小板;HCT:红细胞比容。

3.2.5.生化指标的变化

在28天重复给药不同剂量后，观察提取物对动物肝功能指标的影响t .茅摘录见表5．对该表的分析表明，反复将动物暴露在提取物中导致显著的(谷丙转氨酶活性和血清总蛋白水平均低于对照组(< 0.05)。此外，PAL活性明显下降(雄性30、90和270 mg/kg时，雌性30和90 mg/kg时< 0.05)。然而，ALP活性显著增加(810 mg/kg时，雄性和雌性均较对照组< 0.05)。AST活性在雌雄动物中无显著差异。


组	ALT (U / L)	AST (U / L)	高山(U / L)	血清蛋白(mg/dL)

男性
控制	354.15±18.88^e	30.41±7.09^一个	130.35±14.00^c	6.73±1.02^b
30毫克/公斤	227.93±17.99^d	30.63±4.35^一个	122.51±14.96^公元前	6.20±1.54^b
90毫克/公斤	184.40±16.77^c	39.66±3.66^一个	96.94±9.17^一个	2.51±0.91^一个
270毫克/公斤	112.65±6.90^b	35.88±8.60^一个	109.31±7.90^ab	2.71±0.78^一个
810毫克/公斤	83.34±4.81^一个	36.09±9.88^一个	166.66±10.89^d	2.08±0.66^一个

女性
控制	278.25±15.27^c	23.41±3.94^一个	80.85±6.17^ab	5.74±1.06^b
30毫克/公斤	107.84±6.11^b	24.06±5.23^一个	63.94±6.37^一个	3.13±0.74^一个
90毫克/公斤	70.87±6.77^一个	27.41±4.92^一个	68.89±7.55^一个	3.08±0.72^一个
270毫克/公斤	99.09±13.16^b	26.25±4.35^一个	98.59±9.66^b	4.32±1.06^ab
810毫克/公斤	66.93±13.02^一个	26.91±3.31^一个	126.13±16.42^c	3.77±0.85^一个

数据以平均值±标准差表示，n= 4。根据沃勒-邓肯多重比较检验(< 0.05)。谷丙转氨酶;AST:天冬氨酸转氨酶;ALP:碱性磷酸酶。

不同剂量的效果t .茅提取物对给药28天后动物肾功能指标的影响见表6．这些结果显示显著的(血清和尿尿素水平在270和810 mg/kg时均高于对照组(< 0.05)。然而，血清肌酐水平下降(< 0.05)，而尿肌酐和尿蛋白水平保持不变。


组	S-Urea (mg / dL)	S-Crea (mg / dL)	U-Urea (mg / dL)	U-Crea (mg / dL)	尿蛋白(mg/dL)

男性
控制	73.50±6.75^ab	1.61±0.51^b	4145.83±146.58^一个	7.73±0.95^b	0.36±0.09^一个
30毫克/公斤	62.83±13.84^一个	1.44±0.55^b	3591.67±46.39^一个	8.33±1.68^b	0.60±0.52^一个
90毫克/公斤	72.50±8.24^ab	1.11±0.22^ab	2612.50±61.42^一个	7.14±0.75^ab	0.43±0.23^一个
270毫克/公斤	108.92±10.12^c	1.34±0.16^ab	8100.00±115.31^b	5.42±0.88^一个	0.71±0.40^一个
810毫克/公斤	134.58±18.55^d	0.75±0.19^一个	12283.33±155.20^c	9.39±1.86^b	0.52±0.37^一个

女性
控制	49.42±11.85^一个	1.26±0.37^b	4333.33±99.50^b	7.14±1.77^ab	0.37±0.10^一个
30毫克/公斤	42.33±3.19^一个	1.20±0.25^b	3341.67±121.84^ab	6.35±1.99^ab	0.58±0.33^一个
90毫克/公斤	50.50±5.95^一个	0.86±0.20^ab	2812.50±34.35^一个	5.75±3.15^ab	0.73±0.44^一个
270毫克/公斤	81.92±15.04^b	0.99±0.35^ab	4983.33±62.31^b	3.57±0.82^一个	0.85±0.11^一个
810毫克/公斤	95.50±10.99^b	0.63±0.04^一个	10158.33±74.65^c	7.67±2.51^b	0.47±0.19^一个

数据以平均值±标准差表示，n= 4。根据沃勒-邓肯多重比较检验(< 0.05)。S-Crea:血清肌酐，U-Crea:尿肌酐，s -尿素:血清尿素，u -尿素:尿尿素。

提取液对动物脂质的影响见表7．对该表的分析表明，动物重复暴露于不同剂量的提取物显著(< 0.05)显著提高了雌雄动物的总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平(除雄性为90 mg/kg外)。亦有显著增加(< 0.05)的甘油三酯水平在90和270 mg/kg的雄性和试验剂量的雌性，除了90 mg/kg的对照组动物。所有动物的高密度脂蛋白/低密度脂蛋白比值均大于1。


组	甘油三酸酯(mg / dL)	T-cholesterol (mg / dL)	高密度脂蛋白(mg / dL)	低密度脂蛋白(mg / dL)	高密度脂蛋白/低密度脂蛋白比	粥样硬化指数

男性
控制	87.96±3.05^一个	79.70±6.57^一个	39.94±7.10^一个	22.17±7.29^ab	2.09±1.26^一个	1.03±0.31^b
30毫克/公斤	87.04±5.72^一个	116.34±11.18^cd	57.79±14.58^ab	41.14±6.94^c	1.46±0.52^一个	1.08±0.36^b
90毫克/公斤	104.63±14.02^b	89.72±5.79^ab	59.09±14.01^ab	9.70±1.27^一个	8.34±1.83^b	0.54±0.17^一个
270毫克/公斤	117.59±3.16^b	123.05±10.84^d	67.42±10.14^b	32.11±10.83^公元前	2.29±0.78^一个	0.85±0.29^ab
810毫克/公斤	84.48±6.95^一个	100.00±6.82^公元前	53.57±6.55^ab	29.53±4.83^公元前	1.86±0.42^一个	0.88±0.17^ab

女性
控制	74.81±6.23^一个	61.15±7.20^一个	32.14±2.63^一个	14.04±7.75^一个	2.91±1.52^b	0.91±0.24^一个
30毫克/公斤	100.37±7.37^b	102.71±14.19^b	59.63±8.17^b	23.00±2.99^ab	2.71±1.18^ab	0.79±0.31^一个
90毫克/公斤	64.44±5.41^一个	97.94±10.96^b	44.74±1.87^ab	40.31±12.50^c	1.20±0.43^ab	1.19±0.28^ab
270毫克/公斤	91.30±11.40^b	86.36±9.83^b	36.26±5.14^一个	31.85±6.45^公元前	1.17±0.27^一个	1.40±0.33^b
810毫克/公斤	92.04±4.93^b	87.88±4.08^b	46.00±6.49^ab	23.48±4.82^ab	2.09±0.84^ab	0.93±0.20^ab

数据以平均值±标准差表示，n= 4。根据沃勒-邓肯多重比较检验(< 0.05)。HDL:高密度脂蛋白;LDL:低密度脂蛋白;AI:致动脉硬化指数;T-Chol:总胆固醇。

3.2.6.肝脏和肾脏的组织学切片

反复给药t .茅在剂量为270毫克/公斤或更少的情况下，对大鼠的肝脏和肾脏组织没有不良影响(图4而且5)．然而，当剂量为810毫克/公斤时，在两性的肾切片上均可见坏死。

(一)

(b)

图4

水提物的作用t .茅叶对雌性大鼠(H&E × 400)肝脏(a)和肾脏(b)组织学特征的影响。A1、B1:控制;A2、B2: 30 mg/kg;A3、B3: 90 mg/kg;A4、B4: 270 mg/kg;A5、B5: 810 mg/kg。G =肾小球;N:坏死;VNS:门静脉横断;S:正弦曲线; H: hepatocytes; Pt: proximal tube; Dt: distal tube. The liver and kidney photomicrographs presented in the document represent the general appearance observed in at least three of the four animals in each group.

(一)

(b)

图5

水提物的作用t .茅叶片对雄性大鼠(H&E × 400)肝脏(a)和肾脏(b)组织学特征的影响。A1、B1:控制;A2、B2: 30 mg/kg;A3、B3: 90 mg/kg;A4、B4: 270 mg/kg;A5、B5: 810 mg/kg。G:肾小球;N:坏死;S:正弦曲线;H:肝细胞; Pt: proximal tube; Dt: distal tube. The liver and kidney photomicrographs presented in the document represent the general appearance observed in at least three of the four animals in each group.

4.讨论

一种物质的毒理学概况有助于评估其对人类的风险。然而，动物的不良变化对人类毒性有很强的预测价值。当一种物质有毒时，其主要目标是肝脏、肾脏、造血细胞和血管[5］．因此，对这些组织正常功能的标记物水平的评估可以反映物质的毒性程度。非洲和亚洲的传统医学使用t .茅几个世纪以来，植物用于治疗各种疾病，没有科学证据证明它的安全性。正是在这种对它的无害性有一个想法的逻辑中，这项工作得以进行。必威2490因此，本研究表明t .茅即使单次给药剂量为5000 mg/kg，也没有任何毒性迹象。第一周观察到的体重增加的轻微增加是由于这些动物的采食量增加，以抵消高剂量提取物的作用。由于在整个实验过程中没有观察到死亡，LD₅₀的水萃取物t .茅因此，高于5000毫克/公斤。于是，叶子t .茅根据Hodge和Steiner毒性量表[24，25］．这一结果证实了Dokuparthi等人的工作。26的甲醇萃取物t .茅在白化病小鼠中，5000 mg/kg剂量的种子是无害的。

反复给药从叶子中提取的水提取物t .茅不同剂量连续28天无变化(体重增加和食物摄入量< 0.05)。这一结果可以反映处理动物的饲料消耗和它们的体重增长是同时进化的，这将反映饲料消耗对试验组和对照组动物的体重增长的直接影响。这种提取物不会引起动物厌食症。事实上，这种提取物中缺乏单宁酸[13，以其厌食和抗营养特性而闻名，可以证实这些结果。

造血是生命的重要过程，传统药物和草药都可能影响造血。对动物模型血液参数的评价可提供有关植物提取物的血液效益及其毒性表现的信息[27］．本研究的血液学评估结果未显示血液学参数有明显变化。然而，显著下降(在90和270 mg/kg时，观察到的雄性红细胞压积和血红蛋白水平< 0.05)可能是由于动物的过度饮水，而不是贫血，因为红细胞水平没有观察到显著差异。总白细胞及其差异未见明显变化。由于这些细胞是先天免疫和适应性免疫的主要效应器[28，29]，可以推断提取物对免疫反应没有影响。所有剂量的提取物也没有改变血小板的数量，这意味着叶提取物对止血没有作用，止血是由血小板控制的。所有的观察都表明，在本研究中使用的剂量下，提取液具有非血毒性质。类似的效果之前已经观察到乙醇提取物Lychnophora松树而且Anthonotha macrophylla［30.，31］．

显著下降(在所有剂量的ALT活性< 0.05)和在两性动物中高达270 mg/kg的ALP反映了我们的提取物在这些剂量下对肝脏的保护作用。事实上，提取物会加强肝细胞膜的选择性通透性，从而导致血清酶和蛋白质水平的降低。由于谷丙转氨酶是一种主要局限于肝脏的酶，因此被认为是肝毒性的主要指标[22，32]，其血清浓度的降低对肝脏是有利的。AST活性的无变化表明，除了对肝脏无害外，对t .茅提取在肌肉上。碱性磷酸酶存在于肝脏、骨骼、心脏、骨骼肌、肾脏、大脑、胰腺和血细胞中[33］．显著增加(男性和女性在810 mg/kg时ALP活性< 0.05)可能是由于肝胆功能改变，或可能是由于提取物中存在的某些化合物在此剂量下造成的未知组织损伤(细胞溶解效应)。因此，ALP活性增加是胆汁淤积症的一个显著特征，其特征是胆道排泄不足[34］．然而，肝脏组织学没有发现异常。

肾脏是药物及其代谢物排泄的主要途径，因此，肾脏会接触到药物中通常含有的高浓度潜在有毒物质。尿蛋白水平以及血清和尿液中尿素和肌酐的浓度被用作肾功能的第一线测量指标[35］．血清尿素水平从90mg /kg和尿尿素水平从270 mg/kg同时增加，要么是因为提取物中氮化合物含量高，要么是因为排出的氮代谢产物丰富，因为尿素是鸟氨酸循环代谢过程的结果，是排出体内多余氮的主要代谢途径。在同一给药期间，高浓度(810 mg/kg)该提取物对肾脏造成不良影响(坏死)。这可能是由于毒性代谢物的过度活跃[11］．然而，血清和尿肌酐和尿蛋白含量的变化在雌雄动物的肾功能不全中并不是很明显。

反复给药从叶子中提取的水提取物t .茅对动物的脂质没有影响。事实上，根据谢弗和门什的说法[36)，过量的“坏”胆固醇(LDL)和缺乏“好”胆固醇(HDL)是动脉粥样硬化的危险因素。然而，在这项研究中，这两个参数同时增加，但HDL/LDL胆固醇比值大于1可以排除动脉粥样硬化的风险，因此，毒性。因此，当高密度脂蛋白胆固醇/低密度脂蛋白比值小于“1”时，动脉粥样硬化的风险很高，因此，提示有毒性，当高密度脂蛋白胆固醇/低密度脂蛋白比值在“1”和“2”之间时，提取物对脂质谱没有显著的有益作用，而当高密度脂蛋白胆固醇/低密度脂蛋白比值大于“2”时，提取物可能有显著的有益作用。从…的叶子中提取的水提取物Tectona茅在男性中，90 mg/kg的剂量可以被描述为显著的有益，因为高密度脂蛋白/低密度脂蛋白胆固醇比值为8.34±1.83。

5.结论

结果表明，急性给药的水提物t .茅没有任何毒性迹象。在长期给药期间，该提取物在30和90 mg/kg剂量下对大鼠不存在任何毒性风险，但在810 mg/kg剂量下会导致肾脏坏死。需要进一步的毒理学研究来评估这种植物的诱变、抗诱变和致癌作用在体外而且在活的有机体内还有慢性毒性。

缩写

t .茅：	Tectona茅
方差分析:	单因素方差分析
扫描电镜:	平均标准错误。
):	苏木精和伊红
经合组织:	经济合作与发展组织
红细胞表面:	红细胞
血红蛋白:	血红蛋白
LYM:	淋巴细胞
中期:	平均血细胞体积
格兰:	粒细胞
白细胞:	白细胞
PLT:	血小板
HCT:	血细胞比容
ALT:	丙氨酸氨基转移酶
AST:	天冬氨酸转氨酶
高山:	碱性磷酸酶
S-Crea:	血清肌酐
U-Crea:	尿肌酐
S-Urea:	血清尿素
U-Urea:	尿液尿素
高密度脂蛋白:	高密度脂蛋白
低密度脂蛋白:	低密度脂蛋白
人工智能:	粥样硬化指数
T-Chol:	总胆固醇。

数据可用性

本研究中所使用和分析的所有数据，如有必要，均可从通讯作者处获得。

伦理批准

根据喀麦隆德斯昌大学机构伦理审查委员会的建议，这项工作是在动物福利方面开展的。BCH1202 / FS / UDS / 2018)。

利益冲突

作者声明本研究不涉及任何利益冲突。

作者的贡献

GTK, SPCF和DG设计了研究。DPDC分析组织学切片。GTK在HBLF的协助下进行实验。GTK和L-CNF进行统计分析。JBS, NK和SPFCCF阅读并提交稿件。

致谢

作者感谢Bandjoun Evangelic大学解剖和病理细胞学实验室(喀麦隆)实现了组织病理学部分，并感谢Nguemnin Kamseu Patriciale提供的技术援助。

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毒理学杂志

水提物的毒理学概况Tectona茅马鞭草科叶子:喀麦隆传统医学中用于治疗伤寒的药用植物

摘要

1.背景

2.材料与方法

2.1.植物材料

2.2.提取物的制备

2.3.实验动物

2.4.急性毒性研究

2.5.Subchronic毒性

2.6.血液分析

2.7.生物化学分析

2.8.组织病理学分析

2.9.统计分析

3.结果

3.1.急性毒性研究

3.2.亚慢性毒性研究

3.2.1.食物消费的演变

3.2.2.体重的进化

3.2.3.相对器官重量的变化

3.2.4.血液参数的变化

3.2.5.生化指标的变化

3.2.6.肝脏和肾脏的组织学切片

4.讨论

5.结论

缩写

数据可用性

伦理批准

利益冲突

作者的贡献

致谢

参考文献

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