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体积 2021年 |文章的ID 6623609 | https://doi.org/10.1155/2021/6623609

Tiji卡姆Ouijdane Benayad, Mohamed Berrabah易卜拉欣El Mounsi Mostafa Mimouni, 植物化学的概要文件和抗氧化活性黑种草L在摩洛哥”,科学世界日报, 卷。2021年, 文章的ID6623609, 12 页面, 2021年 https://doi.org/10.1155/2021/6623609

植物化学的概要文件和抗氧化活性黑种草L在摩洛哥

学术编辑器:Mehrbakhsh Nilashi
收到了 2020年12月04
修改后的 03年4月2021年
接受 07年4月2021年
发表 2021年4月20日

文摘

背景黑种草L (NS)是一种强大的抗氧化剂和药用植物和许多应用尤其是在传统医学治疗呼吸道、胃肠道、风湿性,和炎症性疾病以及癌症。客观的。本研究的目的是提取来自摩洛哥的活性成分黑种草L并确定其抗氧化性能。我们假设的化合物的分离黑种草L有一个积极的还是消极的影响抗氧化剂。同时研究这个,我们探索了不同的方法来提取和分离的化合物黑种草L和抗氧化剂进行测试(β胡萝卜素和DPPH)对所有收集到的分数。方法黑种草L被索格利特和母亲hot-extracted提取并使用硅胶柱层析法分离与适当的洗脱液。定性的植物化学的测试来确定化学家庭黑种草L种子进行了分数。他们也确认并用气相色谱-质谱和HPLC-DAD特征。然后,研究了抗氧化活性β胡萝卜素漂白和DPPH自由基清除剂测试。结果与结论。母亲提取己烷跳频生成的八个不同的分数(SH1-8)和丙酮提取物足总生成的11个分数(SA1-11)。的跳频分数高的脂肪酸比例,足总分数了一些有趣的多酚衍生物的化合物。植物化学的筛查发现次生代谢物如多酚类黄酮、生物碱、类固醇、萜烯香豆素类、单宁和皂甙。我们发现只有两个不同极性的溶剂(正己烷、丙酮)可以很容易地同时提取和分离的组件黑种草l .抗氧化剂分数,我们收集活动接近参考化合物比相应的母亲提取但更活跃。此外,一些集成电路50分数的值从丙酮提取物是从己烷比的。因此,抗氧化活性黑种草L是归因于类黄酮和多酚比脂肪酸。总之,己烷分离提取提供了一个更为明显比丙酮提取物抗氧化测试的积极影响。

1。介绍

人工抗氧化剂如丁羟甲苯(二叔丁基对甲酚)和叔丁基羟基茴香醚(BHA)通常报告的效率延迟细胞恶化但也怀疑等负面健康影响致癌作用和毒性1]。因此,替代天然抗氧化剂可以降低健康风险。黑种草(NS)是一个传统和自然的抗氧化剂来源(2,3]。事实上,NS自由基的抑制能力(4,5),还可以显著降低氧化应激(6,7]。

黑种草或黑色香菜,是传统的药用植物有许多治疗使用约旦民间传说。它是用于治疗呼吸道、胃肠道风湿性,癌症和炎症性疾病,以及[8,9]。它还可以用于治疗各种呼吸系统疾病全球在摩洛哥,巴基斯坦,和欧洲南部10]。

的种子NS用作香料的面包、酸奶、卤汁、调味酱和沙拉。在伊斯兰文化中,NS被称为“El Habba Saouda”和传统医学中使用引用谚语说“除了死亡对所有疾病的药物。“这句话仍然是一个谜,直到科学能够确定它的治疗特性(11]。

考虑生物的丰富遗产,可能种子提取物可以包含一个或多个活性成分,专门针对每个疾病。事实上,次生代谢产物的多样性(12- - - - - -14可以解释这各种各样的治疗用途。

大多数以前的研究探讨了化合物热或cold-extracted极性或非极性溶剂以及精油(15,16]。这些提取包含几个家庭的化合物的混合物;因此不大可能,一个定义良好的复合解释了所有的治疗用途。在这项工作中,我们专注于两个重要的母亲可能包含不同种类的次生代谢物的提取。

己烷是一种非极性溶剂,只能提取非极性化合物,如脂质(脂肪酸)。另一方面,丙酮是一种极性溶剂,可以提取类黄酮和多酚等极地实体。使用中等极性的溶剂(氯仿和乙酸乙酯),其中包含两组化合物的混合物可能会抑制分离。本研究旨在同时提取和分离这些次生代谢物和评估他们的抗氧化活性。我们所知,这是第一个研究使用色谱分离摩洛哥的次生代谢物黑种草。要做到这一点,我们母亲的提取分离,与已知的抗氧化活性,并生成一些分数,进而通过抗氧化测试。只有那些分数表现出抗氧化活性测试地前进。

化合物的迁移TLC板被用来确定化合物的数量,或化合物,组中存在的分数,并观察使用紫外线灯直接在盘子上。GC-SM和HPLC-DAD分析被用于复合识别和解释每个部分的抗氧化活性。

2。材料和方法

2.1。化学试剂

所有溶剂和化学化合物从西格玛奥德里奇购买。商业有机溶剂、己烷、氯仿,乙酸乙酯,丙酮均为分析纯(∼99.5%)。化合物(硅胶、DPPH自由基,β胡萝卜素)使用高纯度。植物化学的放映用TLC, Liebermann-Burchard,梅耶尔试剂、Dragendorff, Folin-Ciocalteu。

2.2。植物材料

黑种草L使用种子收获在摩洛哥在上赛季和从当地市场购买Oujda城市。他们在搅拌机清洗和地面获得细粉并存储在一个黑暗的地方,以供将来使用。

2.3。提取

粉末受到使用以下溶剂萃取:正己烷、氯仿、乙酸乙酯和丙酮。拔牙发生在24小时内使用索氏仪器在40 - 50°C。那时溶剂蒸发rotavapor (BUCHI rotavapor r - 210)在真空旋转40°C。提取产量的百分比计算的质量种子粉最初放在索格利特。

2.4。分数是通过柱色谱法分离

只有两个提取物为评价选择,丙酮和正己烷的起源,由于通过柱色谱法分离的时间敏感性质。这两个溶剂选择因为他们lipophilia差距明显;极性的差异将允许同时提取分离的复合群体有不同的物理化学性质。事实上,己烷是一种非极性溶剂,促进疏水性化合物的溶解度,而极性溶剂丙酮溶解亲水性化合物。

提取部分通过硅胶柱层析法使用20%正己烷/ 80%二氯甲烷为己烷洗脱液系统提取和环己烷50% / 50%二氯甲烷为丙酮提取洗脱液系统。柱层析法的尺寸是6.5厘米×47厘米和孔隙度的硅胶是60°(63 - 200年μ米)。

2.5。识别分析
2.5.1。气相色谱与质谱(gc - ms)分析

采用日本岛津公司调查进行gc - ms仪器(GC-MS-QP2010)计算机控制在70 eV。必威2490约1μl(每个分数注入(GC)列(30 m×0.25毫米,0.25μ米)的流量下氦气等于1.4 mL / min。扫描持续了28分钟,电离的温度维持在200°C。化合物的识别和量化测定比较保留指数和光谱质量碎片与计算机图书馆NIST147自由(17]。

2.5.2。高效液相色谱法加上二极管阵列检测器(HPLC-DAD)分析

丙酮提取物中酚类化合物的识别分数进行分析高效液相色谱使用水域e2695和二极管阵列检测器。通过C18柱色谱进行分离(5μ米、250×4.6毫米)。溶剂组成和梯度洗脱过程遵循Mechraoui et al。18)做了一些调整。洗脱梯度是由一个二进制系统(水/醋酸(2% v / v)和B:乙腈,pH = 2.6)。渐变过程是0 - 5分钟:95%和5% B,然后25 - 30分钟:65%和35% B, 35 - 40分钟:30%和70% B;和降价分钟:95%和5% b 0.9毫升/分钟的流量和30μL分数样本注入后经过0.45μm过滤器。紫外检测是280至360海里18]。酚类化合物被确定通过比较保留时间和UV-detection相对于标准。

2.5.3。植物化学的筛选

植物化学的测试依赖于特定的启示者为每个类型的化学家庭复合(类固醇、生物碱和黄酮类化合物)。该方法的原理是基于视觉的观察颜色变化通过TLC板上喷涂探测器直接或通过添加几滴探测器的解决方案。这些方法详细描述了作者在文献[19,20.]。

植物化学的筛选进行了薄层色谱法。支持的硅胶薄层色谱板铝盘(荧光指数254海里丙烯酰胺分析,Sigma-Aldrich)和洗脱液用于实现分离。不同溶剂的开发人员使用的试剂化学筛选。

类固醇/萜烯。固醇被Liebermann-Burchard试剂标识。50毫升乙醇加入5毫升的乙酸酐和5毫升的硫酸在冰上。分数描述使用薄层色谱板进行粉10分钟的100°C。(19]。

生物碱。Mayer试剂(1 g的植物提取物被汞钾碘和水在试管中)被用于生物碱的提取。降水会发生如果测试是正面的。Dragendorff试剂:钾tetraiodobismuthate粉在TLC板部分分离。橙色斑点检测到在365 nm紫外线灯(21]。

类黄酮。间变性大细胞淋巴瘤引起的溶液3和1%铵粉在TLC板与分数。黄色斑点显示黄酮,蓝色斑点显示酚酸,和红点显示没食子酸的存在22]。

皂苷。2% SbCl3在氯仿溶液粉在TLC板与分数。红色荧光斑点检测在254纳米的紫外线灯(20.]。

多酚年代。多酚被Folin-Ciocalteu试剂标识。在TLC板与分数,Folin-Ciocalteu试剂粉,斑点检测到365纳米的紫外线灯。

丹宁酸。FeCl 2%的解决方案3和醋酸粉在分数放在TLC板。黄色斑点检测在366纳米21]。

香豆素类。香豆素是被两个过程。首先,2% KOH溶液是由一个粉粉在TLC板或5%的解决方案(CH3有限公司2在甲醇)Pb。斑点的可视化在365纳米的紫外线灯21]。

2.6。抗氧化活动
2.6.1。β胡萝卜素漂白试验

这个方法是由太阳和Ho (23)和基于测量吸光度的470海里,由于亚油酸的分解。乳剂的β−carotene-linoleic酸准备Tween20和过氧化氢。2毫克β胡萝卜素溶解在10毫升氯仿。1毫升的这个解决方案添加到20μL亚油酸和200毫克渐变40。氯仿蒸发在40°C下真空用旋转蒸发器和残渣被充气本100毫升水剧烈搅动。4毫升的乳液放置在一系列包含200管μ在不同浓度L样本分数。管也动摇了,读取吸光度在470海里。管被放置在50°C 120分钟的控制,它只包含乳状液和甲醇。吸光度是记录和表达的抑制百分比是使用方程(1)。集成电路50是50%抑制浓度决定图形% I =f(C)曲线上的推断X设在的价值Y= 50%的抑制。集成电路50确定提取和分数。为β胡萝卜素,抑制百分比计算根据以下方程: 在哪里AA(120)是120分钟的吸光度;交流(120)是控制在120分钟吸光度;和交流(0)是控制吸光度0分钟。

2.6.2。DPPH自由基清除活性

DPPH自由基活动是由Gramza-Michalowska方法(24]。DPPH是一种稳定的激进,自由电子在氮原子上。在抗氧化剂DPPH,颜色从紫色变为黄色(25]。在该测试中,不同浓度的分数被添加到甲醇溶液的DPPH自由基(0.004% m / v)。样本孵化30分钟在室温和吸光度是记录在517海里一个空白的解决方案。抑制百分比计算使用方程(2)。抑制浓度(IC50)的浓度,抑制50%的DPPH(我% = 50)。抑制百分比计算使用以下公式: 在哪里交流的吸光度是没有抗氧化剂(负控制)和DPPHAsample的吸光度DPPH的一种抗氧化剂。

3所示。结果与讨论

3.1。提取收益率

的连续萃取黑种草L种子(NS),母亲提取物(跳频和FA)的收益率计算相对于起始种子粉的质量放在索氏仪器。热萃取比冷提取更有利,因为浸渍和提供更高的收益率26]。一般来说,母亲的颜色提取获得或多或少是深棕色。结果表明,母亲己烷提取物,跳频,是最丰富的(34.2%),而丙酮提取,母足总,只有2%。它可以强调NS含有必需脂肪酸的成分(大约30%)。必威2490最后残留可能缺乏它的化学成分和纤维组成的展览45.6%的收益率。这个产量是类似于Khoddami et al。27)(37.33%)和马索(28)(36%)。然而,Antuono et al。28只有26%的获得)NS在摩洛哥的种子同样,太阳和Ho (23)获得比较丙酮提取收益率为2.5%。

3.2。丙酮和正己烷提取分离

只有两个有前途的母亲从己烷提取物跳频和丙酮足总被硅胶层析分离。分离是缓慢和分数收集每五分钟和TLC板上系统地评估。

1显示了组装的收益率分数与各自的母亲提取。收益率计算相对于母亲提取物的质量跳频足总开始时使用。这个过程后,母亲己烷提取生成8个分数,SH1-8为丙酮,分数有11个分数,SA1-11


己烷 丙酮
分数 收益率/ FH (%) 分数 收益率/ FA (%)

跳频 One hundred. 足总 One hundred.
SH1 72.35 SA1 62.88
SH2 3.45 SA2 9.92
SH3 0.40 SA3 3.30
SH4 0.67 SA4 3.55
SH5 5.12 SA5 0.15
SH6 1.34 SA6 2.31
SH7 9.11 SA7 1.16
SH8 4.3 0.42
SA9 0.44
SA10 0.05
SA11 15.82

己烷生成的八个分数(表1)显示不同的收益率是最高的SH1以72.35%紧随其后SH7(9.11%)。其他人给收益率不到5.12%。分数计算生成的丙酮提取物的收益率相对于母亲的丙酮提取物的质量(足总)介绍开始。SA1代表了最高的收益率在62.88%紧随其后SA11在15.82%。其他分数都不到10%。

3.3。gc - ms分析
3.3.1。己烷提取

的结果跳频用气相色谱-质谱呈现在图描述1和表2。提取后的记录色谱图(图1)展示了著名的八个化合物的存在。在表2,85.9%的化学成分被确定为亚麻油酸,棕榈,棕榈,十八烯酸。


的名字 本研究 引用的合成
TR %的空气 (29日] (30.] (27] (31日] (10]

1 2.4 -decadienal 15.10 1.79 1。2
2 2-oxo-methyl酯棕榈酸 15.59 1.06
3 苯酚4-methoxy-2.3.6-trimethyl - 18.41 1.56
4 十六烷酸甲酯酯 22.60 1.32 13.1 12 - 13% 14.11 1。9
5 抗坏血酸2.6 -dihexadecanoate 23.11 4.39
6 油酸甲酯 24.36 2.96 23.8 22% 21.25 +
7 亚油酸 25.12 80.65 58.5 54 - 55% 56.71 67.59 +
8 E.Z-1.3.12-Nonadecatriene 25.61 6.24
硬脂 2。3 2 - 3%
9.12 -octadecadienoic酸(Z.Z) / cis亚油酸 10.18
-9.12 (9 e.12e) -octadecadienoic酸 4.2
9.12 -heptadecadienoate 4.56
-9.17 -octadecadienal z (9) 2。3

+的存在。

我们注意到,根据表中2种子从摩洛哥东部主要含有亚油酸(80.26%)和更少的软脂酸和油酸。这是与其他作者的工作(10,27,29日- - - - - -31日]。

其他化合物的存在还不到6.24%,但应该注意的是,大多数化合物提取有类似的结构。也观察到的其他化合物提取不同的文学。这可以解释为自发的化学反应发生的结果(即物理条件。光和温度)没有任何实验干预。

在摩洛哥,Gharby et al。29日]报道58.5%的油酸酯化己烷提取提取后,虽然Khodami et al。27显示己烷提取的NS主要是不饱和脂肪酸如棕榈、亚麻油酸,十八烯酸。水虎鱼等。30.)报道,土耳其NS含55%不饱和脂肪酸。身份不明的组件在酯化己烷提取代表只有13%。这些可能是依赖于酯化/甲基化过程。Ekowati et al。31日和De Oliveira和卡特10]报道许多其他化合物中没有我们的工作。

3.3.2。分数的己烷提取

的识别结果分数(SH1-8)跳频通过gc - ms分析了表3。结果表明存在相当大的各种化合物。我们观察到,多数是脂肪酸。


分数 图片数量 的名字 TR %的空气

SH1 1 2.4 -decadienal 15.11 4.95
2 月桂酸 18.68 1.87
3 棕榈酸 22.61 8.64
4 17-bromopropanoic酸 23.26 9.3
5 1-Octadecanol 23.58 17.79
6 亚油酸 24.36 18.29
7 十七酸 24.64 11.02
8 9-Octadecanoic 2-butoxyethyl酯酸(Z) 25.79 28.12

SH2 1 辛酸。8-hydroxy - 16.23 2.61
2 甲基azelaaldehydate 16.77 2.60
3 壬二酸 18.26 9.44
4 Laural二甲基缩醛 18.89 12.14
5 棕榈酸 22.62 40.98
6 亚油酸 24.37 17.10
7 8-Octadecenoic酸 24.43 1.25
8 十七酸 24.62 16.35

SH3 1 2.4 -decadienal 15.24 1.70
2 棕榈酸。甲基酯 22.60 5.65
3 1-Octadecanol 23.84 87.32
4 油酸。甲基酯 24.34 5.31

SH4 1 十六烷二甲基- 7.9 15.17 9.97
2 十六烷 18.13 10.84
3 二十三acid10.14.18.22-tetramethyl 22.58 11.17
4 17 pentatriacontene 24.59 60.37
5 Lignocerol 24.79 7.62

SH5 1 十六烷2.6.11.15-tetramethyl - 17.55 0.29
2 9-Eicosene。€。 18.78 1.79
3 棕榈酸。甲基酯 22.60 2.65
4 9-Tricosene。(Z) - 23.28 2.70
5 亚油酸 24.05 92.54

SH6 1 二十烷 18.13 2.19
2 二氯乙酸。heptadecyl酯 18.77 4.08
3 9-Dicosene 21.14 5.12
4 棕榈酸。甲基酯 22.60 4.09
5 -dihexadecanoate 2.6 l -(+)抗坏血酸 23.03 14.37
6 9-Tricosene 23.28 6.60
7 1-Octadecanol 23.91 47.22
8 油酸 24.81 12.34
9 9-Hexacosene 25.24 3.95

SH7 1 十六烷二甲基- 7.9 15.18 6.11
2 十七烷8-methyl - 15.18 3.71
3 十六烷2.6.11.15-tetramethyl - 17.55 8.44
4 戊酸。5-hydroxy -。2.4 -di-t-butylphenyl酯 17.83 3.87
5 十七烷,2 -甲基- 18.13 11.68
6 9-Eicosene。€。 18.78 16.82
7 二氯乙酸。heptadecyl酯 21.15 6.42
8 棕榈酸。甲基酯 22.60 18.89
9 9-Tricosene。(Z) - 23.28 9.74
10 亚油酸 24.35 14.08

SH8 1 2.4 -decadienal 15.16 3.82
2 9-Eicosene。€。 18.77 16.53
3 二氯乙酸。heptadecyl酯 21.14 16.84
4 棕榈酸。甲基酯 22.60 24.91
5 1-Octadecanol 23.58 13.23
6 油酸。甲基酯 24.39 5.57
7 硬脂酸。甲基酯 24.62 10.49
8 9-Hexacosene 25.23 8.59

TR:保留时间;%的空气:化合物的百分比。

几个成分出现在不同的分数(例如,棕榈酸中确定分数SH1,SH2,SH3,SH5,SH6,SH7,SH8;亚油酸在SH1,SH2,SH5,SH7和油酸分数SH3,SH6,SH8。脂肪酸的出现在许多分数可以解释的干扰化合物迁移的列,因为大量的脂肪酸。事实上,高数量的脂肪酸及其衍生物迁移柱层析法差。为了克服这个问题,我们进行离心,然后冷却提取−4°C分离固体脂肪。只有1.5%的脂肪酸被取消使用此方法。

一般来说,自然提取的植物产品不断改变了氧化或其他化学物质的反应。因此,他们的百分比变化无限期尽管良好的保护。例如,橄榄油为一整年保留它的物理化学特征,但失去味道质量随时间(32]。数量和质量的变化己烷提取和分数在迁移期间的色谱柱是有道理的。此外,色谱柱微酸性,洗脱溶剂含有过渡金属,这可能会导致额外的化学反应和转换。

3.4。HPLC-DAD分析

高效液相色谱分析的结果提出了在色谱图(图2)表明丙酮提取物的成分和它的分数,而表4显示了识别成分。在Y设在,峰的强度值是任意的。我们可以比较峰的强度在相同的方案,但是我们无法与别人进行比较,因为收集到的分数集中在rotavapor每次通过蒸发。因此,我们只能比较的色谱峰的位置X设在。


样本 化合物

1 足总 没食子酸
对苯二酚
芹黄素
柚苷配基
抗坏血酸
半胱氨酸
芦丁。
槲皮素
山柰酚

2 SA1 没食子酸

3 SA2 没食子酸
对苯二酚
芹黄素

4 SA3 没食子酸
苯邻二酚

5 SA4 柚苷配基
6 SA5 ND

7 SA6 ND

8 SA7 抗坏血酸
半胱氨酸

9 ND

10 SA11 芦丁
槲皮素
组氨酸

ND:没有完成。

丙酮提取分数给不同色谱己烷相比分数。峰值显示不同强度取决于他们的丰富(图2)。

足总包含几个化合物的混合物。没食子酸是主要的化合物在图2。这也是清晰可见SA1,SA2,SA3分数。我们的结果与报道的协议Mechraoui et al。18]。除了山柰酚,所有化合物中发现母亲消失在提取分离分数。应该注意的是,分离成功以后,最后,每个部分包含只有一个(SA1,SA4),两个(SA3,SA7),或三个(SA2,SA11)化合物。由于技术问题,一些分数(SA5,SA6,)无法进行分析和识别。

3.5。植物化学的筛选

56总结了植物化学的筛查结果的丙酮和正己烷提取和分数。植物化学的组件的类固醇,萜烯、香豆素类、生物碱、多酚、类黄酮和皂苷。


分数 类固醇萜烯 香豆素类 生物碱 丹宁酸 多酚类物质 类黄酮 皂苷

跳频 + + + + + + + +
SH1 + + + + + + + + + +
SH2 + + + +
SH3 + + +
SH4 + +
SH5 + + +
SH6 + + +
SH7 + + + + + + + + + +
SH8 + + +

(−)缺席;(+)低的存在;(+ +)主持的存在;(+ + +)高的存在。

分数 类固醇萜烯 香豆素类 生物碱 丹宁酸 多酚类物质 类黄酮 皂苷

足总 + + + + + + + + +
SA1 + +
SA2 + + +
SA3 + + + + +
SA4 + + +
SA5 + + +
SA6 + +
SA7 +
全) + +
SA9 + +
SA10 + +
SA11 + + + + + + +

(−)缺席;(+)低的存在;(+ +)主持的存在;(+ + +)高的存在。

母亲己烷提取类固醇,萜烯、丹宁酸、皂苷、生物碱(表5)。然而,香豆素类、多酚和类黄酮缺席。丙酮提取母只含有多酚,类固醇,单宁,类黄酮和生物碱(表6),而香豆素和皂甙是不存在。

大多数分数有生物碱、皂甙以及一些次级代谢产物,如类固醇和萜烯。香豆素类、多酚类和黄酮类化合物出现在一些分数,尽管他们没有在最初的提取(表5)。这可以解释通过不透明的现象,有些颜色是可以被他人,或颜色的差异在测量波长。

的植物化学的结果NS己烷提取由Javed(类似报道33),除了没有固醇己烷提取。其他植物化学的研究34植物化学的筛选接近我们的结果描述)。然而,香豆素类和皂甙缺席我们的结果报道。

己烷母亲提取相反,丙酮的复合家庭母亲分数相同的分数(表分离6)。茶多酚和黄酮类物质的存在被标记在几个分数,和其他化学家庭。相比之下,一些作者报告,丙酮提取物有高水平的类固醇和低香豆素类(34]。

3.6。β胡萝卜素漂白试验

7礼物的价值所必需的抑制浓度减少50%氧化(IC50)抗氧化剂β胡萝卜素。给出的值为丙酮和正己烷提取物、母亲以及相应的分数,而butylhydroxyanisole的参考价值(底部钻具组合)。在一开始,收集到一定数量分数非常低。因此,我们不能进行整体测试的分数没有耗尽我们的股票。己烷分数都比他们的母亲提取更活跃跳频;然而母亲丙酮提取足总比三个分数更活跃。


参考 溶剂 β胡萝卜素漂白试验

底部钻具组合 己烷 跳频 SH1 SH4 SH7 SH8 - - - - - - - - - - - - - - - - - -
集成电路50毫克/毫升 集成电路50毫克/毫升 56 13.2 1.02 14.1 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -
0.053 丙酮 足总 SA1 SA2 SA3 SA4 SA5 SA10 SA11
集成电路50毫克/毫升 3.72 7.36 4.46 - - - 10.04 0.064 0.216 - - -

分数从己烷提取分散的活动如下:SH4>SH1>SH7>跳频SH4引用最高的活动和相似之处了吗底部钻具组合(表7),可能由于类固醇和萜烯的存在。虽然SH1SH7还含有类固醇和类黄酮,他们有一个弱活动相比SH4。这可以归因于其他家庭的存在的化学化合物,抑制明显的活动。

并用gc - ms表征显示许多抗氧化剂成分的存在(35),也有类似的结构底部钻具组合。此外,派生的萜烯被确定,如2.4 -decadienal 9-Tricosene (Z)。此外,脂肪酸类似物,如亚油酸,17 pentatriacontene,或2.4 -decadienal,也被发现。支持这种说法,SH4,SH1,SH7比较高的植物物种抗氧化活性像圣人一样,百里香,姜黄(35,36]。提取的脂质,目前抗氧化和抗癌植物甾醇也发现(37,38]。

在丙酮提取和分数,我们观察到抑制活动分布如下:SA5>SA10>足总>SA2>SA1>SA4。第一组的分数组成的SA5SA10有更高的活动比足总与集成电路50非常接近底部钻具组合(表7)。第二组组成SA2,SA1,SA4表现出较弱的抗氧化活性比足总

辛格et al。39)报道,足总是最有趣的部分NS因为它有抗氧化活性最高。Mechraoui et al。18)发现,在β−胡萝卜素测试,集成电路50从丙酮提取为0.2444毫克/毫升。的集成电路50纯粹的没食子酸价值发现陆和邱40)(10.50µg / mL)不同于我们发现SA1只含有没食子酸。的集成电路50芦丁是估计为26.2毫克/毫升杨et al。41]。唯一的纯如芹黄素类黄酮、槲皮素和柚苷配基给了有趣的抗氧化活性(42,43]。这个结果可以推断结果发现分数SA4,SA5,SA10因为他们只包含这些类黄酮。

3.7。DPPH自由基清除活性

(IC的值50)由DPPH抗氧化测试表进行了总结8。他们为丙酮和正己烷的母亲进行了提取,以及相应的分数,这都与抗坏血酸的参考价值。集成电路50己烷提取最高和丙酮母亲提取明显低于四的分数。


参考 溶剂 DPPH测试

抗坏血酸 己烷 跳频 SH7 SH8 - - - - - - - - - - - - - - - - - -
集成电路50毫克/毫升 集成电路50毫克/毫升 23.25 16.01 8.7 - - - - - - - - - - - - - - - - - -
0.018 丙酮 足总 SA1 SA2 SA3 SA4 SA5 SA10 SA11
集成电路50毫克/毫升 0.79 3.84 1.12 16.8 1.91 0.28 0.31 0.23

在己烷,SH7SH8更活跃跳频,特别是SH8的集成电路50少三倍。抗氧化活性增加如下:SH8>SH7>跳频

在丙酮中,母亲的活动值提取所有分数之间的中间;抗氧化活性增加的方向SA11>SA5>SA10>足总>SA2>SA4>SA1>SA3。三个最活跃的部分,SA11,SA5,SA10,都有一个集成电路50低于足总但不与抗坏血酸的引用。

考虑到两个抗氧化测试,β胡萝卜素和DPPH丙酮提取的,分数比从己烷提取更加活跃。为β胡萝卜素,最好的价值被发现丙酮分数SA5与集成电路50= 0.064毫克/毫升,这是非常接近底部钻具组合的参考,有IC的价值50= 0.053毫克/毫升。在DPPH的情况下,丙酮分数显示接受的IC50值,特别是分数SA5,SA10,SA11曾是集成电路50值约为0.25毫克/毫升。然而,他们是非常远离参考抗坏血酸(0.018毫克/毫升)。

哈[15)报道,NS己烷提取来自两个不同的地方在同一国家(马来西亚)给集成电路50= 8.17 mg / mLNS收获在莎阿南和集成电路50= 4.48 mg / mLNS在Kentalan收获。在也门,DPPH测试显示一个集成电路50= 12.79毫克/毫升,在苏丹等于4.48毫克/毫升(15在埃塞俄比亚,IC50为8.52毫克/毫升。Soulaimanifar et al。15报告非常高的集成电路50值,104.76毫克/毫升,在伊朗。在突尼斯,Ksouda et al。44)报道,NS己烷提取了集成电路50= 31毫克/毫升,密切值23.25毫克/毫升。种子和提取方法的起源次生代谢物的数量和质量的关键因素。在马来西亚,超临界流体萃取的DPPH测试己烷提取给出了一个集成电路50= 1.58毫克/毫升(45]。

SH7抗氧化活性可以通过其植物化学的分析来解释由于萜烯的存在,类固醇,茶多酚和类黄酮的分数。此外,gc - ms分析了二烯官能团和不饱和脂肪酸,这是已知的抗氧化活性。据报道,棕榈酸有抗氧化作用[46)β−胡萝卜素测试(47,48];多酚类物质苯甲酸等衍生品也可以抑制氧化(47,49]。SH7SH8显示出类似的化学成分和脂肪酸,这也许可以解释他们的抗氧化活动的一部分。

的抗氧化活性足总可以归因于它的类黄酮。HPLC-DAD确定没食子酸、对苯二酚芹黄素,柚苷配基,抗坏血酸、半胱氨酸、芦丁、槲皮素和山柰酚。Mechraoui et al。18报道一个集成电路50从突尼斯= 0.1602毫克/毫升NS。集成电路50从巴基斯坦是2.69毫克/毫升NS。这些结果与我们是不同的IC50等于0.79毫克/毫升。

分数被HPLC-DAD确定的化学结构和部分的抗氧化活性与商业纯化合物。纯商业没食子酸IC50据报道为1.50µ克/毫升(40芹黄素,集成电路50是30.3µg / mL,芦丁有一个集成电路50-50 = 23.7µ克/毫升(41,50],槲皮素提供集成电路50= 1µ克/毫升(40]。这些产品都是分数的重要化合物SA1,SA2,SA11。很明显,对单一化合物的分数和分数与多个化合物不具有相同的抗氧化活性水平。可以有一个积极的协同效应在活动或- 1(抑制剂效果)。如果我们比较的活动SA1SA3,我们可以看到儿茶酚的没食子酸在抗氧化活性有负面影响,然而,在的情况下SA2、对苯二酚和芹黄素对活动起到了积极的影响。因此,测试是需要能够预测的协同效应。

4所示。结论

本研究描述了同步过程中化学成分的提取分离黑种草L种子基于两个精心挑选的溶剂的极性。我们已经成功地提取和分离两个家庭的化合物具有不同的物理化学和植物化学的性质。分析和分离方法如气和HPLC-DAD允许我们描述和识别的大多数母亲提取和分离馏分成分。应该注意的是,摩洛哥黑种草L是富含亚油酸油酸但低或棕榈酸。

抗氧化活性评价β胡萝卜素漂白和DPPH清除剂。抗氧化活性是由于每个分数和解释的成分。黑种草L包含重要的次生代谢产物,是作为一个可靠的抗氧化化合物来源摩洛哥NS给出了一个竞争力的集成电路50与世界各地的几个国家。

我们表明,次生代谢物分离有利于抗氧化活性。事实上,我们多次发现分数比母亲更活跃的提取物。此外,一些分数相比有一个强调活动的引用。

我们已经成功识别的一些有趣的分数由母亲指定提取和生成化合物抗氧化活动负责。事实上,可以说,β胡萝卜素测试,抗氧化剂主要集中在己烷分数SH4,SA5,SA10。对于DPPH测试,分数SH8,SA5,SA10,SA11包括活动的实体黑种草l .未来研究应该探索活动分数在体外并比较其前后抗氧化活性在动物模型诱导氧化应激引起的疾病。

缩写

NS: 黑种草
跳频: 己烷提取
足总: 丙酮提取
SH1-8: 分数与己烷提取分离
SA1-11: 分数与丙酮提取分离
气相: 气相色谱与质谱分析
HPLC-DAD: 高效液相色谱与二极管阵列检测器。

数据可用性

用来支持研究的数据都包含在这篇文章,也可以从相应的作者。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

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